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黃曲霉毒素M1與赭曲霉毒素A聯(lián)合作用誘導(dǎo)分化Caco-2細(xì)胞凋亡的機(jī)制

發(fā)布時(shí)間：2019/11/5 9:45:48     瀏覽次數(shù)：1553

黃曲霉毒素M1  赭曲霉毒素A  凋亡  分化的Caco-2細(xì)胞

目的:研究了黃曲霉毒素M1（Aflatoxin M1,AFM1）和赭曲霉毒素（ochratoxin A,OTA）交互作用誘導(dǎo)分化人結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞凋亡及其作用機(jī)制。方法:AFM1和OTA單獨(dú)及聯(lián)合作用于分化的Caco-2細(xì)胞后,通過阿爾瑪藍(lán)（Alamar-Blue）法測(cè)量細(xì)胞存活率,研究AFM1和OTA對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用;通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,活性氧熒光探針檢測(cè)細(xì)胞活性氧（ROS）釋放量,JC-1線粒體膜電位熒光探針檢測(cè)細(xì)胞線粒體膜電位變化。蛋白免疫印跡法檢測(cè)凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9的表達(dá)水平。結(jié)果:AFM1和OTA可抑制分化的Caco-2細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡,單獨(dú)使用12μmol/L AFM1和6μmol/L OTA作用于細(xì)胞存活率分別為95.59%和93.14%,聯(lián)合作用下細(xì)胞存活率為81.57%,提示聯(lián)合作用具有協(xié)同作用;AFM1和OTA單獨(dú)處理細(xì)胞24 h后,細(xì)胞的凋亡率分別為25.68%和33.7%,聯(lián)合作用細(xì)胞的凋亡率為37.4%;AFM1和OTA單獨(dú)作用下細(xì)胞ROS的釋放量分別是空白對(duì)照組的1.37倍和1.79倍,交互作用是空白對(duì)照組的6.21倍,交互作用對(duì)活性氧的釋放量明顯增加。結(jié)論:線粒體膜電位和線粒體相關(guān)凋亡蛋白的表達(dá)水平變化,說明AFM1和OTA可能通過線粒體途徑誘導(dǎo)分化的Caco-2細(xì)胞凋亡。